生物系の研究者の方に質問なのですが、
(ウェットで専門的な質問で申し訳ない)
GFP抗体で良いものは無いでしょうか？
Clonetech社のEGFPベクターを使っており、
Clonetech社のGFP抗体でウェスタンブロットしているのですが、
293T細胞などをウェスタンブロットすると、
無処理の細胞でさえ意味の分からんバンドがたくさん出てきて困ってます。
目的のGFP融合タンパク質は非常に発現が悪いタンパク質なので、
非特異的なバンドの少ない(特に30-60kDa付近)GFP抗体を御存知でしたら御教授下さい。
マウスでもラビットでも構わないし、
常識の範囲内なら、金に糸目もつけません。
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Alnasl
満足40pt
Invitrogen - Molecular Probes - Home
URLはMolecular Probesです。直接的な答えではないのでポイントはいただかなくてもよいです。
ClonetechのEGFP vectorを使ったことがあります。発現しにくいタンパクでしたが、しかしClonetech社の抗体でクリアなシングルバンドが得られました。293系細胞でした。
文章からはどのような検討をされたのかはわかりませんが、別会社製を試す前に、別ロットを出すよう頼んでみてもだめでしょうか？抗体はロットが変わると反応がガラリとよくなることがあります。あるいは2次抗体がべたべた反応することもあるので、こちらを変える、抗体濃度を変える、など。
蛍光顕微鏡で明らかに発現の有無が見える、などの明らかなデータが示せるなら、それをもとにClontech社に問い合わせてみるのも良いかもしれません。
参考になるとよいのですが。成功を祈ります。
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match7
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match7この質問へのコメント
質問の情報
- 登録日時
- 2005-06-14 19:11:00
- 終了日時
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